毛細管電泳是一種高效、高靈敏度的分離分析技術,是利用電場作用下帶電粒子在水性介質中的遷移行為,實現(xiàn)對樣品中各組分的有效分離。在電泳過程中,待分析樣品通過進樣器進入充滿緩沖溶液的毛細管內,在外加電場的作用下,樣品中的離子或分子根據(jù)其電荷性質和大小,以不同的速度向毛細管兩端遷移。通過檢測器對分離后的組分進行檢測,從而實現(xiàn)對樣品中各組分的定性和定量分析。已經在生物醫(yī)學、環(huán)境科學、食品安全等領域得到了廣泛的應用。
根據(jù)分離原理的不同,毛細管電泳可以分為以下幾類:
1. 膠束電動毛細管色譜(MEKC):利用表面活性劑膠束與待分析物之間的相互作用,實現(xiàn)對待分析物的分離。適用于疏水性物質的分析。
2. 等電聚焦(IEF-CE):利用兩性電解質在電場作用下形成pH梯度,實現(xiàn)對待分析物根據(jù)其等電點的差異進行分離。適用于蛋白質等兩性電解質的分析。
3. 膠束電動復合(MECC):結合了膠束電動毛細管色譜和等電聚焦的特點,可以實現(xiàn)對待分析物的高效分離。
4. 離子交換(IEX-CE):利用離子交換樹脂對待分析物中的各種離子進行選擇性吸附,實現(xiàn)對待分析物的分離。適用于離子型物質的分析。
5. 親和毛細管電泳(ACE):利用待分析物與特異性親和配體之間的親和力,實現(xiàn)對待分析物的分離。適用于生物大分子如蛋白質、核酸等的分析。
毛細管電泳在生物醫(yī)學研究中的應用:
1. 藥物分析:具有高分辨率、高靈敏度等優(yōu)點,可以用于藥物的快速篩選、定量分析和質量控制。例如,對中藥制劑中的有效成分進行分析,可以提高藥物分析的準確性和效率。
2. 基因分析:可以用于DNA、RNA等生物大分子的分離和定量分析。例如,對基因突變進行檢測,可以為遺傳病的診斷提供依據(jù)。
3. 蛋白質組學研究:在蛋白質組學研究中具有重要應用價值。例如,對蛋白質進行分離和定量分析,可以為蛋白質的功能研究提供基礎數(shù)據(jù)。
4. 細胞內組分分析:可以用于細胞內組分的分離和定量分析。例如,利用毛細管電泳技術對細胞內的代謝物進行分析,可以為細胞功能研究提供依據(jù)。